Russian to English Medical Biology (-tech,-chem,micro-) seed train (bioreactors)

Оценка возможности деконсервации культуры в выбранную питательную среду.

Основной целью данного исследования являлось оценка характеристик роста клеточной культуры при деконсервации культуры в выбранную питательную среду.

Эксперимент проводился в формате колб Эрленмейера. Восстановление криоконсервированной культуры клеток-продуцента рабочего банка клеток: деконсервацию осуществляли путем отогрева криовиалы на водяной бане при температуре 37°С в течение 2-3 мин до достижения полного оттаивания. В ламинарном шкафу содержимое виалы переносят в предварительно подогретую среду для культивирования. Из криовиалы с суспензией клеток-продуцентов в растворе криопротектора (DMSO) отбирают весь объем (~1000 мкл) и производят засев в полную питательную средy. Спустя некоторое время (30 мин) проводят отбор пробы для оценки численности и жизнеспособности клеток. На следующий день (через 24 часа) проводят повторный отбор проб для оценки численности и жизнеспособности клеток, после чего определяют факт удвоения клеток. Его наличие свидетельствует об успешном оживлении культуры. Далее производят добавление среды и последующее культивирование до стадии пересева. О её наступлении судят по увеличению численности клеток.